Переживание изолированных нейронов

Для культивирования изолированных нейронов использовали метод, разработанный для фрагментов мозга прудовика. Нейроны вносили в каплю растопленного агара с температурой 35-37° на покровном стекле, после застывания агара препарат помещался во флакон со средой.

Отмывку и отбор нейронов перед культивированием проводили под бинокулярной лупой при помощи микропипеток. Перед Заливкой в агар отобранные нейроны выдерживали в питательной среде в течение 1-2 час. За это время поврежденные нейроны меняли свою морфологию (разрушались и темнели ядра или пузырилась цитоплазма) и их отлавливали микропипетками. Суспендирование нейронов проводилось не в физиологическом растворе, а непосредственно в питательной среде. В суспензии нейронов, отобранных и отмытых в нескольких сменах стерильной среды, не оставалось глиальных клеток. Необходимость тщательной отмывки клеток перед культивированием вызвана сильной зараженностью тканей и клеток прудовика микроорганизмами. Мы так же расскажем где профессиональное оборудование для фитнеса купить можно с доставкой и по низким ценам.

Для культивирования изолированных нейронов использовали те же среды, что и для фрагментов ткани. Изолированные нейроны, лишенные глии, способны к переживанию in vitro в течение 1-2 недель. Клетки сохраняют при этом электрические параметры и чувствительность к медиаторам. Нейроны, полностью лишенные отростков, также удовлетворительно переживают в течение этого времени. Культивирование изолированных гигантских нейронов совместно с фрагментами ткани не увеличивало значительно времени переживания этих нейронов. Если же изолированной оказывалась только сома нейрона, а аксон оставался внутри ганглия, то время переживания таких нейронов было значительно больше, до 6-7 недель. Точно так же значительно лучше переживали гигантские нейроны, сохранившие при изоляции из ткани свое глиальное окружение.

Нейрон и Память: Пластичность, обучение и память