Фрагменты нервной ткани моллюсков

Стерилизацию гемолимфы проводят путем фильтрации через асбестовые и миллипоровые фильтры под вакуумом, для облегчения фильтрации гемолимфу можно разбавить в 2 раза солевым раствором. Перед употреблением ставят контроль на стерильность и в случае заражения фильтруют еще раз.

Солевой раствор стерилизуют автоклавированием, все остальные компоненты расфасованы стерильно.

Концентрации солей в солевом растворе рассчитаны как разница концентраций солей в обычном физиологическом растворе для прудовика и в 10% среды Игла.

Физиологический раствор для мозга виноградной улитки имеет следующий состав (в мМ): NaCl - 100; КС1 - 5; MgCl2-СаС - 8; рН - 7,5. Концентрация аминокислот в гемолимфе виноградной улитки приблизительно в 2 раза выше, чем в гемолимфе прудовика. Основываясь на концентрациях солей и аминокислот в гемолимфе виноградной улитки, использовали для культивирования ее нервной ткани среду следующего состава: NaCl - 3400 мг/л, КС1 - 230 мг/л, MgCl2 - 6Н20 - 400 мг/л,

СаС-260 мг/л, (рН 7,5, доводили бикарбонатом натрия), 20% среды Игла, 20% гидролизата лактатальбумина, 2-5% бычьей сыворотки, 0,4 мг/л глютамина, антибиотики (пенициллин 100 ед/мл, стрептомицин - 50 ед/мл), глюкоза - 400 мг/мл. Замена бычьей сыворотки в среде гемолимфой виноградной улитки не улучшала переживания культуры.

Морфологические характеристики растущих культур
Многократно проведенные опыты, длительностью от 3 недель до 3,5 месяцев, показали, что нервная ткань моллюсков способна К длительному переживанию в условиях органотипической культуры. В процессе культивирования наблюдается рост отростков нервных клеток и миграция глиальных и соединительнотканных элементов. В зоне роста располагаются тяжи нервных волокон, соединительнотканные пленки и глиальные клетки. Мелкие глиальные клетки располагаются также вдоль нервных волокон по ходу роста.